Gelatin dapat didefinisikan sebagai protein biodegradable yang bersumber dari hidrolisis parsial kolagen, yang sering digunakan di berbagai industri termasuk makanan, farmasi, dan kosmetik. Penggunaan gelatin yang berasal dari bahan baku babi menjadi permasalahan di Indonesia, yang mayoritas penduduknya beragama Islam, karena babi diharamkan untuk dikonsumsi. Adapun produk berbahan gelatin dari sapi juga dikhawatirkan dapat memicu penyakit sapi gila atau Bovine Spongiform Encephalopathy (BSE) serta penyakit Mulut dan Kuku (PMK) dalam dunia kesehatan. Penelitian ini bertujuan untuk memanfaatkan limbah sisik ikan betok yang berasal dari Provinsi Jambi sebagai sumber gelatin halal. Metode ekstraksi yang digunakan yaitu metode asam yang menawarkan beberapa keuntungan, termasuk hasil yang tinggi dan proses hidrolisis relatif lebih cepat. Hasil optimum dari ekstraksi gelatin sisik ikan betok yaitu pada perlakuan 1:9 (b/v) dengan lama perendaman 24 jam di mana rata-rata rendemen gelatin yang diperoleh sebesar 10,79% menunjukkan hasil yang relatif tinggi dan sebanding dengan rendemen gelatin yang dilaporkan pada penelitian sebelumnya, begitu pun pada pH, kadar air, kadar abu dan nilai viskositas. Hasil karakteriasi analisa spektrum FTIR gelatin sisik ikan betok (Anabas testudineus) juga menunjukkan adanya kemiripan gugus fungsi dengan gelatin komersial yaitu Amida A, I, II,dan III. Hal ini menandakan struktur protein pada gelatin tetap terjaga.